您好,现在程程来为大家解答以上的问题。细胞凋亡流式图四个象限怎么看,细胞凋亡流式图分析相信很多小伙伴还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、在二维散点图上,PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。
2、一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞,annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞,而双染是凋亡中期的。
3、需要在散点图上先画出4个象限,位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。
4、Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂,在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。
5、扩展资料:用标记了FITC的AnnexinⅤ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生,正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的。
6、检测annexin V-FITC单染的细胞并检查FL1-FL2(或FL3)散点图,保证在左上和右上象限内没有颗粒。
7、如果有颗粒出现在上端象限则说明有荧光渗漏;此时FL1的荧光被FL2 (或FL3)PMT检测到了。
8、为了纠正这种现象,增加FL1漏到FL2(或FL3)荧光的补偿%(这可能在1-5%之间)。
9、如果这个调节没有有效地去除FL2的阳性信号,此时要降低FL2(或FL3) PMT的电压。
10、参考资料来源:百度百科-Annexin V。
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